ଓଷ୍ଟିଓଆର୍ଥ୍ରାଇଟିସ୍ (OA) ହେଉଛି ଦୀର୍ଘକାଳୀନ କ୍ରନିକ୍ ଡିଜେନେରେଟିଭ୍ ହାଡ଼ ସନ୍ଧି ରୋଗ ମଧ୍ୟରୁ ଗୋଟିଏ ଯାହା 65 ବର୍ଷରୁ ଅଧିକ ବୟସ୍କ ଜନସଂଖ୍ୟାକୁ ପ୍ରଭାବିତ କରେ [
1]। ସାଧାରଣତଃ, OA ରୋଗୀମାନଙ୍କୁ କ୍ଷତିଗ୍ରସ୍ତ କାର୍ଟିଲେଜ, ପ୍ରଦାହ ହୋଇଥିବା ସାଇନୋଭିୟମ୍ ଏବଂ କ୍ଷୟ ହୋଇଥିବା ଚଣ୍ଡ୍ରୋସାଇଟ୍ସ ଚିହ୍ନଟ କରାଯାଏ, ଯାହା ଯନ୍ତ୍ରଣା ଏବଂ ଶାରୀରିକ କଷ୍ଟକୁ ଟ୍ରିଗର କରେ [
2]। ଗଣ୍ଠି ଯନ୍ତ୍ରଣା ମୁଖ୍ୟତଃ ପ୍ରଦାହ ଦ୍ୱାରା ସନ୍ଧିରେ କାର୍ଟିଲେଜର ଅବନତି ହେତୁ ହୋଇଥାଏ, ଏବଂ ଯେତେବେଳେ କାର୍ଟିଲେଜ ଗୁରୁତର ଭାବରେ କ୍ଷତିଗ୍ରସ୍ତ ହୁଏ, ସେତେବେଳେ ହାଡ଼ ପରସ୍ପର ସହିତ ଧକ୍କା ଖାଇ ଅସହ୍ୟ ଯନ୍ତ୍ରଣା ଏବଂ ଶାରୀରିକ କଷ୍ଟ ସୃଷ୍ଟି କରିପାରେ [
3]। ଯନ୍ତ୍ରଣା, ଫୁଲା ଏବଂ ସନ୍ଧିର କଠିନତା ଭଳି ଲକ୍ଷଣ ସହିତ ପ୍ରଦାହ ମଧ୍ୟସ୍ଥିଙ୍କ ସମ୍ପୃକ୍ତି ଭଲ ଭାବରେ ଦସ୍ତାବିଜ କରାଯାଇଛି। OA ରୋଗୀଙ୍କ କ୍ଷେତ୍ରରେ, ପ୍ରଦାହଜନକ ସାଇଟୋକାଇନ୍ସ, ଯାହା କାର୍ଟିଲେଜ ଏବଂ ସବକଣ୍ଡ୍ରାଲ ହାଡର କ୍ଷୟ ସୃଷ୍ଟି କରେ, ସାଇନୋଭିଆଲ୍ ତରଳ ପଦାର୍ଥରେ ମିଳିଥାଏ [
4]। OA ରୋଗୀମାନଙ୍କର ସାଧାରଣତଃ ଦୁଇଟି ପ୍ରମୁଖ ଅଭିଯୋଗ ହେଉଛି ଯନ୍ତ୍ରଣା ଏବଂ ସାଇନୋଭିଆଲ୍ ପ୍ରଦାହ। ତେଣୁ ବର୍ତ୍ତମାନର OA ଚିକିତ୍ସାର ପ୍ରାଥମିକ ଲକ୍ଷ୍ୟ ହେଉଛି ଯନ୍ତ୍ରଣା ଏବଂ ପ୍ରଦାହକୁ ହ୍ରାସ କରିବା। [
5]। ଯଦିଓ ଅଣ-ଷ୍ଟେରୋଏଡାଲ୍ ଏବଂ ଷ୍ଟେରୋଏଡାଲ୍ ଔଷଧ ସମେତ ଉପଲବ୍ଧ OA ଚିକିତ୍ସା, ଯନ୍ତ୍ରଣା ଏବଂ ପ୍ରଦାହ ହ୍ରାସ କରିବାରେ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ପ୍ରମାଣିତ ହୋଇଛି, ଏହି ଔଷଧଗୁଡ଼ିକର ଦୀର୍ଘକାଳୀନ ବ୍ୟବହାର ହୃଦ୍ରୋଗ, ପାକସ୍ଥଳୀ-ଅନ୍ତନଳୀ ଏବଂ ବୃକ୍କ ସମସ୍ୟା ଭଳି ଗମ୍ଭୀର ସ୍ୱାସ୍ଥ୍ୟ ପରିଣାମ ଆଣିଥାଏ [
6]। ତେଣୁ, ଅଷ୍ଟିଓଆର୍ଥ୍ରାଇଟିସ୍ ଚିକିତ୍ସା ପାଇଁ କମ୍ ପାର୍ଶ୍ୱ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ସହିତ ଏକ ଅଧିକ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ଔଷଧ ବିକଶିତ କରିବାକୁ ପଡିବ।
ପ୍ରାକୃତିକ ସ୍ୱାସ୍ଥ୍ୟ ଉତ୍ପାଦଗୁଡ଼ିକ ନିରାପଦ ଏବଂ ସହଜରେ ଉପଲବ୍ଧ ହେବା ଯୋଗୁଁ ଅଧିକ ଲୋକପ୍ରିୟ ହେବାରେ ଲାଗିଛି [
7]। ପାରମ୍ପରିକ କୋରିଆନ ଔଷଧଗୁଡ଼ିକ ଗଣ୍ଠି ରୋଗ ସମେତ ଅନେକ ପ୍ରଦାହ ରୋଗ ବିରୁଦ୍ଧରେ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ପ୍ରମାଣିତ ହୋଇଛି [
8]। ଅକଲ୍ୟାଣ୍ଡିଆ ଲାପ୍ପା ଡିସି ଏହାର ଔଷଧୀୟ ଗୁଣ ପାଇଁ ଜଣାଶୁଣା, ଯେପରିକି ଯନ୍ତ୍ରଣା ଦୂର କରିବା ଏବଂ ପେଟକୁ ଶାନ୍ତ କରିବା ପାଇଁ କ୍ୱିର ସଞ୍ଚାଳନକୁ ବୃଦ୍ଧି କରିବା, ଏବଂ ପାରମ୍ପରିକ ଭାବରେ ଏକ ପ୍ରାକୃତିକ ଯନ୍ତ୍ରଣା ନିବାରକ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଆସୁଛି [
9]। ପୂର୍ବ ରିପୋର୍ଟଗୁଡ଼ିକ ସୂଚାଇଥାଏ ଯେ A. lappa ରେ ପ୍ରଦାହ-ବିରୋଧୀ [
10,
11], ଯନ୍ତ୍ରଣା ନିବାରକ [
12], କର୍କଟ ରୋଗ ପ୍ରତିରୋଧୀ [
13], ଏବଂ ଗ୍ୟାଷ୍ଟ୍ରୋପ୍ରୋଟେକ୍ଟିଭ [
14] ପ୍ରଭାବ। A. lappa ର ବିଭିନ୍ନ ଜୈବିକ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ଏହାର ପ୍ରମୁଖ ସକ୍ରିୟ ଯୌଗିକଗୁଡ଼ିକ ଦ୍ୱାରା ହୋଇଥାଏ: costunolide, dehydrocostus lactone, dihydrocostunolide, costuslactone, α-costol, saussurea lactone ଏବଂ costuslactone [
15]। ପୂର୍ବ ଅଧ୍ୟୟନଗୁଡ଼ିକ ଦାବି କରନ୍ତି ଯେ କଷ୍ଟୁନୋଲାଇଡ୍ ଲିପୋପଲିସାକାରାଇଡ୍ (LPS) ରେ ପ୍ରଦାହ-ବିରୋଧୀ ଗୁଣ ଦେଖାଇଥିଲା, ଯାହା NF-kB ଏବଂ ହିଟ୍ ସକ୍ ପ୍ରୋଟିନ୍ ପାଥୱେର ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ମାଧ୍ୟମରେ ମ୍ୟାକ୍ରୋଫେଜ୍ କୁ ପ୍ରେରିତ କରିଥିଲା [
16,
17]। ତଥାପି, କୌଣସି ଅଧ୍ୟୟନ OA ଚିକିତ୍ସା ପାଇଁ A. lappa ର ସମ୍ଭାବ୍ୟ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପର ତଦନ୍ତ କରିନାହିଁ। ବର୍ତ୍ତମାନର ଗବେଷଣା (ମୋନୋସୋଡିୟମ-ଆୟୋଡୋଆସେଟେଟ) MIA ଏବଂ ଆସେଟିକ ଏସିଡ-ପ୍ରେରିତ ରୋଡେଣ୍ଟ ମଡେଲ ବ୍ୟବହାର କରି OA ବିରୁଦ୍ଧରେ A. lappa ର ଚିକିତ୍ସା ପ୍ରଭାବର ତଦନ୍ତ କରିଛି।
ପ୍ରାଣୀମାନଙ୍କ ମଧ୍ୟରେ ଯନ୍ତ୍ରଣା ଆଚରଣ ଏବଂ OA ର ପାଥୋଫିଜିଓଲୋଜିକାଲ୍ ବୈଶିଷ୍ଟ୍ୟଗୁଡ଼ିକ ଉତ୍ପାଦନ କରିବା ପାଇଁ ମୋନୋସୋଡିୟମ-ଆୟୋଡୋଆସେଟେଟ୍ (MIA) ପ୍ରସିଦ୍ଧ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ [
18,
19,
20]. ଆଣ୍ଠୁ ସନ୍ଧିରେ ଇଞ୍ଜେକ୍ସନ ଦେଲେ, MIA ଚଣ୍ଡ୍ରୋସାଇଟ ମେଟାବୋଲିଜିମକୁ ବିଶୃଙ୍ଖଳିତ କରେ ଏବଂ ପ୍ରଦାହ ଏବଂ ପ୍ରଦାହ ଲକ୍ଷଣଗୁଡ଼ିକୁ ପ୍ରେରଣା ଦିଏ, ଯେପରିକି କାର୍ଟିଲେଜ ଏବଂ ସବକଣ୍ଡ୍ରାଲ ହାଡ଼ କ୍ଷୟ, OA ର ମୁଖ୍ୟ ଲକ୍ଷଣ [
18]। ଆସେଟିକ୍ ଏସିଡ୍ ସହିତ ପ୍ରେରିତ ଲେଖନ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାକୁ ପ୍ରାଣୀମାନଙ୍କରେ ପରିଧିଗତ ଯନ୍ତ୍ରଣାର ସିମୁଲେସନ୍ ଭାବରେ ବହୁଳ ଭାବରେ ବିବେଚନା କରାଯାଏ ଯେଉଁଠାରେ ପ୍ରଦାହ ଯନ୍ତ୍ରଣାକୁ ପରିମାଣାତ୍ମକ ଭାବରେ ମାପ କରାଯାଇପାରିବ [
19]। ମାଉସ୍ ମାକ୍ରୋଫେଜ୍ କୋଷ ରେଖା, RAW264.7, ପ୍ରଦାହ ପ୍ରତି କୋଷୀୟ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଅଧ୍ୟୟନ କରିବା ପାଇଁ ଲୋକପ୍ରିୟ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ। LPS ସହିତ ସକ୍ରିୟ ହେବା ପରେ, RAW264 ମ୍ୟାକ୍ରୋଫେଜ୍ ପ୍ରଦାହ ପଥକୁ ସକ୍ରିୟ କରେ ଏବଂ TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS, ଏବଂ IL-6 ପରି ଅନେକ ପ୍ରଦାହ ମଧ୍ୟସ୍ଥି କ୍ଷରଣ କରେ [
20]। ଏହି ଅଧ୍ୟୟନରେ MIA ପ୍ରାଣୀ ମଡେଲ, ଆସେଟିକ ଏସିଡ-ପ୍ରେରିତ ପ୍ରାଣୀ ମଡେଲ, ଏବଂ LPS-ସକ୍ରିୟ RAW264.7 କୋଷରେ OA ବିରୁଦ୍ଧରେ A. lappa ର ଆଣ୍ଟି-ନୋସିସେପ୍ଟିଭ୍ ଏବଂ ଆଣ୍ଟି-ଇନ୍ଫ୍ଲାମେଟରୀ ପ୍ରଭାବ ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରାଯାଇଛି।
୨. ସାମଗ୍ରୀ ଏବଂ ପଦ୍ଧତି
୨.୧. ଉଦ୍ଭିଦ ସାମଗ୍ରୀ
ପରୀକ୍ଷଣରେ ବ୍ୟବହୃତ A. lappa DC.ର ଶୁଖିଲା ମୂଳ Epulip Pharmaceutical Co., Ltd., (ସିଓଲ, କୋରିଆ) ରୁ ସଂଗ୍ରହ କରାଯାଇଥିଲା। ଏହାକୁ ଗାଚନ୍ ବିଶ୍ୱବିଦ୍ୟାଳୟର କୋରିଆନ୍ ମେଡିସିନ୍ କର୍ଣ୍ଣେଲ, ହର୍ବାଲ୍ ଫାର୍ମାକୋଲୋଜି ବିଭାଗ ପ୍ରଫେସର ଡୋଙ୍ଗହୁନ୍ ଲି ଚିହ୍ନଟ କରିଥିଲେ ଏବଂ ଭାଉଚର ନମୁନା ନମ୍ବର 18060301 ଭାବରେ ଜମା କରାଯାଇଥିଲା।
୨.୨. A. lappa ନିର୍ଗମର HPLC ବିଶ୍ଳେଷଣ
A. lappa କୁ ଏକ ରିଫ୍ଲକ୍ସ ଉପକରଣ (ଡିଷ୍ଟିଲ୍ଡ ୱାଟର, 100 °C ରେ 3 ଘଣ୍ଟା) ବ୍ୟବହାର କରି ବାହାର କରାଯାଇଥିଲା। ନିଷ୍କାସିତ ଦ୍ରବଣକୁ ଏକ କମ୍-ଚାପ ବାଷ୍ପୀଭକ ବ୍ୟବହାର କରି ଫିଲ୍ଟର ଏବଂ ଘନୀଭୂତ କରାଯାଇଥିଲା। −80 °C ତଳେ ଫ୍ରିଜ୍-ଶୁଷ୍କ କରିବା ପରେ A. lappa ନିଷ୍କାସନର ଉତ୍ପାଦନ 44.69% ଥିଲା। A. lappa ର କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିକ୍ ବିଶ୍ଳେଷଣ ଏକ 1260 ଇନଫିନିଟିⅡ HPLC-ସିଷ୍ଟମ୍ (Agilent, Pal Alto, CA, USA) ବ୍ୟବହାର କରି ସଂଯୁକ୍ତ HPLC ସହିତ କରାଯାଇଥିଲା। କ୍ରୋମାଟିକ୍ ପୃଥକୀକରଣ ପାଇଁ, EclipseXDB C18 ସ୍ତମ୍ଭ (4.6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) 35 °C ରେ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିଲା। ନମୁନାର ମୋଟ 100 mg 50% ମିଥାନଲ୍ ର 10 mL ରେ ମିଳାଇ ଦିଆଯାଇଥିଲା ଏବଂ 10 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ସୋନିକେଟ କରାଯାଇଥିଲା। ନମୁନାଗୁଡ଼ିକୁ 0.45 μm ର ଏକ ସିରିଞ୍ଜ ଫିଲ୍ଟର (ୱାଟର୍ସ କର୍ପୋରେସନ, ମିଲଫୋର୍ଡ, MA, USA) ସହିତ ଫିଲ୍ଟର କରାଯାଇଥିଲା। ଚଳମାନ ପର୍ଯ୍ୟାୟ ଗଠନ 0.1% ଫସଫୋରିକ ଏସିଡ୍ (A) ଏବଂ ଆସେଟୋନିଟ୍ରାଇଲ୍ (B) ଥିଲା ଏବଂ ସ୍ତମ୍ଭକୁ ନିମ୍ନଲିଖିତ ଭାବରେ ଏଲିଟ୍ କରାଯାଇଥିଲା: 0-60 ମିନିଟ୍, 0%; 60-65 ମିନିଟ୍, 100%; 65-67 ମିନିଟ୍, 100%; 67-72 ମିନିଟ୍, 0% ଦ୍ରାବକ B ଯାହାର ପ୍ରବାହ ହାର 1.0 mL/ମିନିଟ୍। 10 μL ର ଇଞ୍ଜେକ୍ସନ ପରିମାଣ ବ୍ୟବହାର କରି 210 nm ରେ ନିର୍ଗତ ଜଳ ପର୍ଯ୍ୟବେକ୍ଷଣ କରାଯାଇଥିଲା। ବିଶ୍ଳେଷଣଟି ତ୍ରିପ୍ରତିଲିପିରେ କରାଯାଇଥିଲା।
୨.୩. ପଶୁ ଆବାସ ଏବଂ ପରିଚାଳନା
5 ସପ୍ତାହ ବୟସର ପୁରୁଷ ସ୍ପ୍ରେଗ-ଡାଉଲି (SD) ମୂଷା ଏବଂ 6 ସପ୍ତାହ ବୟସର ପୁରୁଷ ICR ମୂଷାକୁ ସାମଟାକୋ ବାୟୋ କୋରିଆ (ଗ୍ୟଓଙ୍ଗି-ଡୋ, କୋରିଆ) ରୁ କିଣାଯାଇଥିଲା। ପ୍ରାଣୀମାନଙ୍କୁ ସ୍ଥିର ତାପମାତ୍ରା (22 ± 2 °C) ଏବଂ ଆର୍ଦ୍ରତା (55 ± 10%) ଏବଂ 12/12 ଘଣ୍ଟାର ଏକ ଆଲୋକ/ଅନ୍ଧକାର ଚକ୍ର ବ୍ୟବହାର କରି ଏକ କୋଠରୀରେ ରଖାଯାଇଥିଲା। ପରୀକ୍ଷଣ ଆରମ୍ଭ ହେବା ପୂର୍ବରୁ ପ୍ରାଣୀମାନଙ୍କୁ ଏକ ସପ୍ତାହରୁ ଅଧିକ ସମୟ ପାଇଁ ଅବସ୍ଥା ସହିତ ପରିଚିତ କରାଯାଇଥିଲା। ପ୍ରାଣୀମାନଙ୍କୁ ଖାଦ୍ୟ ଏବଂ ପାଣିର ଏକ ଆଡ୍ ଲିବିଟମ୍ ଯୋଗାଣ ଥିଲା। ଗାଚନ୍ ବିଶ୍ୱବିଦ୍ୟାଳୟ (GIACUC-R2019003) ରେ ପ୍ରାଣୀ ଯତ୍ନ ଏବଂ ପରିଚାଳନା ପାଇଁ ବର୍ତ୍ତମାନର ନୈତିକ ନିୟମ ସମସ୍ତ ପ୍ରାଣୀ ପରୀକ୍ଷଣ ପ୍ରକ୍ରିୟାରେ କଡ଼ାକଡ଼ି ଅନୁସରଣ କରାଯାଇଥିଲା। ଅଧ୍ୟୟନଟି ତଦନ୍ତକାରୀ-ଅନ୍ଧ ଏବଂ ସମାନ୍ତରାଳ ପରୀକ୍ଷଣ ଭାବରେ ଡିଜାଇନ୍ କରାଯାଇଥିଲା। ଆମେ ପ୍ରାଣୀ ପରୀକ୍ଷଣ ନୀତିଶାସ୍ତ୍ର କମିଟିର ନିର୍ଦ୍ଦେଶାବଳୀ ଅନୁସାରେ ଇଚ୍ଛାମୃତ୍ୟୁ ପଦ୍ଧତି ଅନୁସରଣ କରିଥିଲୁ।
୨.୪. MIA ଇଞ୍ଜେକ୍ସନ ଏବଂ ଚିକିତ୍ସା
ମୂଷାମାନଙ୍କୁ ଅନିୟମିତ ଭାବରେ 4ଟି ଗୋଷ୍ଠୀରେ ବିଭକ୍ତ କରାଯାଇଥିଲା, ଯଥା ଶାମ୍, କଣ୍ଟ୍ରୋଲ୍, ଇଣ୍ଡୋମେଥାସିନ୍ ଏବଂ ଏ. ଲାପ୍ପା। 2% ଆଇସୋଫ୍ଲୋରେନ୍ O2 ମିଶ୍ରଣ ସହିତ ନିଶ୍ଚେତକ ଦିଆଯିବା ପରେ, ମୂଷାମାନଙ୍କୁ 50 μL MIA (40 mg/m; ସିଗମା-ଆଲଡ୍ରିଚ୍, ସେଣ୍ଟ ଲୁଇସ୍, MO, USA) ଆଣ୍ଠୁ ସନ୍ଧି ଭିତରେ ଇଞ୍ଜେକ୍ସନ ଦିଆଯାଇଥିଲା ଯାହା ଦ୍ୱାରା ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ OA ହୁଏ। ଚିକିତ୍ସା ନିମ୍ନଲିଖିତ ଭାବରେ କରାଯାଇଥିଲା: ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଏବଂ ଶାମ୍ ଗୋଷ୍ଠୀଗୁଡ଼ିକୁ କେବଳ AIN-93G ମୌଳିକ ଖାଦ୍ୟ ସହିତ ବଜାୟ ରଖାଯାଇଥିଲା। କେବଳ, ଇଣ୍ଡୋମେଥାସିନ୍ ଗୋଷ୍ଠୀକୁ AIN-93G ଖାଦ୍ୟରେ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ ଇଣ୍ଡୋମେଥାସିନ୍ (3 mg/kg) ପ୍ରଦାନ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ A. ଲାପ୍ପା 300 mg/kg ଗୋଷ୍ଠୀକୁ A. ଲାପ୍ପା (300 mg/kg) ସହିତ ପରିପୂରକ AIN-93G ଖାଦ୍ୟରେ ନିଯୁକ୍ତ କରାଯାଇଥିଲା। OA ଇଣ୍ଡକ୍ସନ୍ ଦିନଠାରୁ ପ୍ରତିଦିନ ପ୍ରତି 190-210 ଗ୍ରାମ ଶରୀର ଓଜନ ପାଇଁ 15-17 ଗ୍ରାମ ହାରରେ 24 ଦିନ ପାଇଁ ଚିକିତ୍ସା ଜାରି ରଖାଯାଇଥିଲା।
୨.୫. ଓଜନ ବହନକାରୀ ମାପ
OA ଇଣ୍ଡକ୍ସନ ପରେ, ସୂଚୀବଦ୍ଧ ଭାବରେ ଅକ୍ଷମତା-MeterTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, USA) ସହିତ ମୂଷାମାନଙ୍କର ପଛ ଅଙ୍ଗର ଓଜନ-ବହନ କ୍ଷମତା ମାପ କରାଯାଇଥିଲା। ପଛ ଅଙ୍ଗର ଓଜନ ବଣ୍ଟନ ଗଣନା କରାଯାଇଥିଲା: ଓଜନ-ବହନ କ୍ଷମତା (%)।
