ମହମବତୀ ଏବଂ ସାବୁନ୍ ପାଇଁ ଶୁଦ୍ଧ ସାପୋଶନିକୋଭିଆ ଡିଭାରିକାଟା ତେଲ ରିଡ୍ ବର୍ନର୍ ଡିଫ୍ୟୁଜର୍ ପାଇଁ ହୋଲସେଲ ଡିଫ୍ୟୁଜର୍ ଅତ୍ୟାବଶ୍ୟକ ତେଲ ତିଆରି କରେ |

ସଂକ୍ଷିପ୍ତ ବର୍ଣ୍ଣନା:

 

2.1। SDE ର ପ୍ରସ୍ତୁତି

SD ର ରାଇଜୋମଗୁଡିକ ହାନହର୍ବ କୋ (ଗୁରୀ, କୋରିଆ) ରୁ ଶୁଖିଲା b ଷଧ ଭାବରେ କିଣାଯାଇଥିଲା | କୋରିଆ ଇନଷ୍ଟିଚ୍ୟୁଟ୍ ଅଫ୍ ଓରିଏଣ୍ଟାଲ୍ ମେଡିସିନ୍ (KIOM) ର ଡକ୍ଟର ଗୋ-ୟା ଚୋଇ ଦ୍ୱାରା ଉଦ୍ଭିଦ ସାମଗ୍ରୀଗୁଡିକ ଟ୍ୟାକ୍ସୋନୋମିକ୍ ଭାବରେ ନିଶ୍ଚିତ କରାଯାଇଥିଲା | ଏକ ଭାଉଚର ନମୁନା (ସଂଖ୍ୟା 2014 SDE-6) ଷ୍ଟାଣ୍ଡାର୍ଡ ହର୍ବାଲ ରିସୋର୍ସର କୋରିଆ ହରବାରିୟମରେ ଜମା କରାଯାଇଥିଲା | SD ର ଶୁଖିଲା ରାଇଜୋମଗୁଡିକ (320 ଗ୍ରାମ) ଦୁଇଥର 70% ଇଥାନଲ ସହିତ (2 ଘଣ୍ଟା ରିଫ୍ଲକ୍ସ ସହିତ) ବାହାର କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ତାପରେ ଚାପରେ ହ୍ରାସ ହୋଇଥିବା ଚାପରେ ଏକାଗ୍ର କରାଯାଇଥିଲା | ଡିକୋକ୍ସନ୍ ଫିଲ୍ଟର୍, ଲାଇଫିଲାଇଜ୍ ହୋଇ 4 ° C ରେ ଗଚ୍ଛିତ ହୋଇଥିଲା | ଅଶୋଧିତ ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ସାମଗ୍ରୀରୁ ଶୁଖିଲା ନିର୍ଗତ ଅମଳ 48.13% (w / w) ଥିଲା |

 

2.2। ପରିମାଣିକ ଉଚ୍ଚ-କାର୍ଯ୍ୟଦକ୍ଷତା ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି (HPLC) ବିଶ୍ଳେଷଣ |

କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିକ୍ ବିଶ୍ଳେଷଣ ଏକ HPLC ସିଷ୍ଟମ୍ (ୱାଟର୍ସ କୋ, ମିଲଫୋର୍ଡ, MA, ଯୁକ୍ତରାଷ୍ଟ୍ର) ଏବଂ ଏକ ଫୋଟୋଡିଏଡ୍ ଆରେ ଡିଟେକ୍ଟର ସହିତ କରାଯାଇଥିଲା | SDE ର HPLC ବିଶ୍ଳେଷଣ ପାଇଁ, ପ୍ରାଥମିକ-Oପାରମ୍ପାରିକ ମେଡିସିନ୍ ଇଣ୍ଡଷ୍ଟ୍ରି (ଗିଆଙ୍ଗସାନ୍, କୋରିଆ) ପାଇଁ କୋରିଆ ପ୍ରମୋସନ୍ ଇନଷ୍ଟିଚ୍ୟୁଟ୍ ଠାରୁ ଗ୍ଲୁକୋସିଲ୍ସିମିଫୁଗିନ ମାନକ କ୍ରୟ କରାଯାଇଥିଲା, ଏବଂsec-O-ଗ୍ଲୁକୋସିଲହାମାଡଲ୍ ଏବଂ 4′-O-β-D-glucosyl-5-O-ମେଥାଇଲଭାଇସାମିନୋଲ ଆମ ଲାବୋରେଟୋରୀ ମଧ୍ୟରେ ପୃଥକ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରାଲ ଆନାଲିସିସ୍ ଦ୍ୱାରା ଚିହ୍ନଟ ହୋଇଥିଲା, ମୁଖ୍ୟତ N NMR ଏବଂ MS ଦ୍ୱାରା |

SDE ନମୁନାଗୁଡିକ (0.1 ମିଗ୍ରା) 70% ଇଥାନଲ (10 ଏମଏଲ୍) ରେ ଦ୍ରବଣ କରାଯାଇଥିଲା | କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫିକ୍ ପୃଥକତା ଏକ XSelect HSS T3 C18 ସ୍ତମ୍ଭ (4.6 × 250 mm, 5) ସହିତ କରାଯାଇଥିଲା |μମି, ୱାଟର କୋ, ମିଲଫୋର୍ଡ, MA, ଯୁକ୍ତରାଷ୍ଟ୍ର) | ମୋବାଇଲ୍ ପର୍ଯ୍ୟାୟରେ ଏସିଟୋନିଟ୍ରିଲ୍ (ଏ) ଏବଂ 0.1। %% ଏସିଟିକ୍ ଏସିଡ୍ ଜଳ (ବି) ରେ ପ୍ରବାହ ହାରରେ m। M ଏମଏଲ୍ / ମିନିଟ୍ ରହିଥିଲା ​​| ନିମ୍ନଲିଖିତ ଭାବରେ ଏକ ମଲ୍ଟିଷ୍ଟେପ୍ ଗ୍ରେଡିଏଣ୍ଟ୍ ପ୍ରୋଗ୍ରାମ୍ ବ୍ୟବହୃତ ହେଲା: 5% ଏ (0 ମିନିଟ୍), 5–20% ଏ (0-10 ମିନିଟ୍), 20% ଏ (10–23 ମିନିଟ୍), ଏବଂ 20–65% ଏ (23-40 ମିନିଟ୍) | ) ଚିହ୍ନଟ ତରଙ୍ଗଦ eng ର୍ଘ୍ୟ 210–400 nm ରେ ସ୍କାନ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ 254 nm ରେ ରେକର୍ଡ କରାଯାଇଥିଲା | ଇଞ୍ଜେକ୍ସନ ପରିମାଣ 10.0 ଥିଲା |μL. ତିନୋଟି କ୍ରୋମୋନ୍ ନିର୍ଣ୍ଣୟ ପାଇଁ ମାନକ ସମାଧାନ 7.781 ମିଗ୍ରା / ମିଏଲ୍ (ପ୍ରାଥମିକ-) ର ଅନ୍ତିମ ଏକାଗ୍ରତାରେ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରାଯାଇଥିଲା |O-ଗ୍ଲୁକୋସିଲସିମିଫୁଗିନ), 31.125 ମିଗ୍ରା / ମିଏଲ (4′-O-β-D-glucosyl-5-O-ମେଥାଇଲଭିସାମିନୋଲ), ଏବଂ 31.125 ମିଗ୍ରା / ମିଏଲ (sec-O-ଗ୍ଲୁକୋସିଲହାମାଡଲ୍) ମିଥାନୋଲରେ ଏବଂ 4 ° C ରେ ରଖାଯାଇଥାଏ |

2.3। ଆଣ୍ଟି-ଇନଫ୍ଲାମେଟୋରୀ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପର ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ |ଭିଟ୍ରୋରେ |

2.3.1। କୋଷ ସଂସ୍କୃତି ଏବଂ ନମୁନା ଚିକିତ୍ସା |

RAW 264.7 କୋଷଗୁଡିକ ଆମେରିକୀୟ ପ୍ରକାର ସଂସ୍କୃତି ସଂଗ୍ରହ (ATCC, ମାନାସା, ଭିଏ, ଯୁକ୍ତରାଷ୍ଟ୍ର) ରୁ ପ୍ରାପ୍ତ ହୋଇଥିଲା ଏବଂ DMEM ମାଧ୍ୟମରେ 1% ଆଣ୍ଟିବାୟୋଟିକ୍ ଏବଂ 5.5% FBS ଧାରଣ କରିଥିଲା ​​| 37 ° C ରେ 5% CO2 ର ଆର୍ଦ୍ର ପରିବେଶରେ କୋଷଗୁଡିକ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରାଯାଇଥିଲା | କୋଷଗୁଡ଼ିକୁ ଉତ୍ସାହିତ କରିବା ପାଇଁ, ମାଧ୍ୟମକୁ ତାଜା DMEM ମାଧ୍ୟମ ଏବଂ ଲିପୋପଲିସାକାରାଇଡ୍ (LPS, ସିଗମା-ଆଲଡ୍ରିଚ୍ କେମିକାଲ୍ କୋ, ସେଣ୍ଟ୍ ଲୁଇସ୍, MO, ଯୁକ୍ତରାଷ୍ଟ୍ର) ରେ ବଦଳାଗଲା |μg / mL SDE ର ଉପସ୍ଥିତି କିମ୍ବା ଅନୁପସ୍ଥିତିରେ ଯୋଗ କରାଯାଇଥିଲା (200 କିମ୍ବା 400 |μg / mL) ଅତିରିକ୍ତ 24 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ |

2.3.2। ନାଇଟ୍ରିକ୍ ଅକ୍ସାଇଡ୍ (NO), ପ୍ରୋଷ୍ଟାଗ୍ଲାଣ୍ଡିନ E2 (PGE2), ଟ୍ୟୁମର ନେକ୍ରୋସିସ୍ ଫ୍ୟାକ୍ଟର ନିର୍ଣ୍ଣୟ |α(TNF-α), ଏବଂ ଇଣ୍ଟରଲୁକିନ୍ -6 (ଆଇଏଲ୍ -6) ଉତ୍ପାଦନ |

କକ୍ଷଗୁଡିକ SDE ସହିତ ଚିକିତ୍ସା କରାଯାଉଥିଲା ଏବଂ 24 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ LPS ସହିତ ଉତ୍ସାହିତ କରାଯାଇଥିଲା | ପୂର୍ବ ଅଧ୍ୟୟନ ଅନୁଯାୟୀ ଗ୍ରିଜ୍ ରିଜେଣ୍ଟ୍ ବ୍ୟବହାର କରି ନାଇଟ୍ରାଇଟ୍ ମାପ କରି କ production ଣସି ଉତ୍ପାଦନ ବିଶ୍ଳେଷଣ କରାଯାଇ ନଥିଲା |12]। ପ୍ରଦାହକାରୀ ସାଇଟୋକାଇନ୍ସର ଗୁପ୍ତତା PGE2, TNF-α, ଏବଂ IL-6 ନିର୍ମାତାଙ୍କ ନିର୍ଦ୍ଦେଶ ଅନୁଯାୟୀ ଏକ ELISA କିଟ୍ (R&D ସିଷ୍ଟମ୍) ବ୍ୟବହାର କରି ସ୍ଥିର କରାଯାଇଥିଲା | NO ଏବଂ ସାଇଟୋକାଇନ୍ ଉତ୍ପାଦନରେ SDE ର ପ୍ରଭାବ ୱାଲାକ୍ ଏନଭିଜନ୍ ବ୍ୟବହାର କରି 540 nm କିମ୍ବା 450 nm ରେ ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରାଯାଇଥିଲା |™ମାଇକ୍ରୋପ୍ଲେଟ୍ ରିଡର୍ (ପର୍କିନ୍ ଏଲମର୍) |

2.4। ଆଣ୍ଟିଅଷ୍ଟୋଆର୍ଥ୍ରାଇଟିସ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପର ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ |ଭିଭୋରେ |

2.4.1। ପଶୁମାନେ

ପୁରୁଷ ସ୍ପ୍ରେଗ୍-ଡୱଲି ମୂଷା (7 ସପ୍ତାହ ପୁରୁଣା) ସାମ୍ଟାକୋ ଇନ୍କୋ (ଓସାନ୍, କୋରିଆ) ରୁ କିଣାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ନିୟନ୍ତ୍ରିତ ଅବସ୍ଥାରେ 12 ଘଣ୍ଟା ଆଲୋକ / ଅନ୍ଧକାର ଚକ୍ର ସହିତ ରଖାଯାଇଥିଲା |° C ଏବଂ% ଆର୍ଦ୍ରତା ମୂଷାମାନଙ୍କୁ ଏକ ଲାବୋରେଟୋରୀ ଡାଏଟ୍ ଏବଂ ପାଣି ଯୋଗାଇ ଦିଆଯାଉଥିଲା |ବିଜ୍ lib ାପନ। ସମସ୍ତ ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ପ୍ରକ୍ରିୟା ନ୍ୟାସନାଲ ଇନଷ୍ଟିଚ୍ୟୁଟ୍ ଅଫ୍ ହେଲଥ୍ (NIH) ନିର୍ଦ୍ଦେଶାବଳୀ ଅନୁଯାୟୀ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ଡେଜିଓନ୍ ବିଶ୍ୱବିଦ୍ୟାଳୟର ପଶୁ ଚିକିତ୍ସା ଏବଂ ବ୍ୟବହାର କମିଟି (ଡେଜିଓନ୍, ରିପବ୍ଲିକ୍ ଅଫ୍ କୋରିଆ) ଦ୍ୱାରା ଅନୁମୋଦିତ ହୋଇଥିଲା |

2.4.2। ରେଟ୍ ରେ MIA ସହିତ OA ର ଇଣ୍ଡେକ୍ସନ୍ |

ଅଧ୍ୟୟନ ଆରମ୍ଭ ହେବା ପୂର୍ବରୁ ପଶୁମାନଙ୍କୁ ମନୋନୀତ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ଚିକିତ୍ସା ଗୋଷ୍ଠୀକୁ ଦିଆଯାଇଥିଲା (ଗୋଷ୍ଠୀ ପାଇଁ) MIA ସମାଧାନ (3 ମିଗ୍ରା / 50) |μ0.9% ସାଲାଇନ୍ ର L) ସିଧାସଳଖ କେଟାମାଇନ୍ ଏବଂ ଜାଇଲାଜାଇନ୍ ମିଶ୍ରଣ ଦ୍ an ାରା ଆନାସ୍ଥେସିଆ ଅଧୀନରେ ଡାହାଣ ଆଣ୍ଠୁ ର ଇଣ୍ଟ୍ରା-ଆର୍ଟିକୁଲାର ସ୍ପେସରେ ଇଞ୍ଜେକ୍ସନ ଦିଆଯାଇଥିଲା | ମୂଷାମାନେ ଅନିୟମିତ ଭାବରେ ଚାରୋଟି ଗୋଷ୍ଠୀରେ ବିଭକ୍ତ ହୋଇଥିଲେ: ) ଇଣ୍ଡୋମାଥାସିନ୍- (IM-) ଚିକିତ୍ସିତ ଗୋଷ୍ଠୀ (2 ମିଗ୍ରା / କେଜି) MIA ଇଞ୍ଜେକ୍ସନ୍ ସହିତ | 4 ସପ୍ତାହ ପାଇଁ MIA ଇଞ୍ଜେକ୍ସନର 1 ସପ୍ତାହ ପୂର୍ବରୁ SDE ଏବଂ IM ସହିତ ମୂଷାମାନେ ମ ally ଖିକ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହେଉଥିଲେ | ଏହି ଅଧ୍ୟୟନରେ ବ୍ୟବହୃତ SDE ଏବଂ IM ର ମାତ୍ରା ପୂର୍ବ ଅଧ୍ୟୟନରେ ନିୟୋଜିତମାନଙ୍କ ଉପରେ ଆଧାରିତ ଥିଲା |10,13,14].

2.4.3। ହିନ୍ଦପାଓ ଓଜନ ବହନ ବଣ୍ଟନର ମାପ |

OA induction ପରେ, ହିଣ୍ଡପାଉର ଓଜନ ବହନ କ୍ଷମତାରେ ମୂଳ ସନ୍ତୁଳନ ବ୍ୟାହତ ହେଲା | ଓଜନ ବହନ କରୁଥିବା ସହନଶୀଳତାର ପରିବର୍ତ୍ତନକୁ ଆକଳନ କରିବା ପାଇଁ ଏକ ଅକ୍ଷମତା ପରୀକ୍ଷଣକାରୀ (ଲିଣ୍ଟନ୍ ଇନଷ୍ଟ୍ରୁମେଣ୍ଟେସନ୍, ନର୍ଫାଲ୍କ, ୟୁକେ) ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଥିଲା | ମୂଷାଗୁଡ଼ିକୁ ଯତ୍ନର ସହିତ ମାପ ପ୍ରକୋଷ୍ଠରେ ରଖାଗଲା | ପଛ ଅଙ୍ଗ ଦ୍ୱାରା ନିର୍ମିତ ଓଜନ ବହନ କରୁଥିବା ଶକ୍ତି ହାରାହାରି 3 s ଅବଧି ମଧ୍ୟରେ ଥିଲା | ଓଜନ ବଣ୍ଟନ ଅନୁପାତକୁ ନିମ୍ନ ସମୀକରଣ ଦ୍ୱାରା ଗଣନା କରାଯାଇଥିଲା: [ଡାହାଣ ପଛ ଅଙ୍ଗରେ ଓଜନ / (ଡାହାଣ ପଛ ଅଙ୍ଗରେ ଓଜନ + ବାମ ପଛ ଅଙ୍ଗରେ ଓଜନ)] × 100 [15].

2.4.4। ସେରମ୍ ସାଇଟୋକାଇନ୍ ସ୍ତରର ମାପ |

ରକ୍ତ ନମୁନାଗୁଡିକ 4 ° C ରେ 10 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ 1,500 ଗ୍ରାମରେ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗ୍ କରାଯାଇଥିଲା; ତାପରେ ସେରମ୍ ସଂଗ୍ରହ କରାଯାଇ ବ୍ୟବହାର ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ −70 ° C ରେ ଗଚ୍ଛିତ ହେଲା | IL-1 ର ସ୍ତର |β, IL-6, TNF-α, ଏବଂ ସେରମ୍ରେ PGE2 ନିର୍ମାତାଙ୍କ ନିର୍ଦ୍ଦେଶ ଅନୁଯାୟୀ R&D ସିଷ୍ଟମ୍ (ମିନିନାପଲିସ୍, MN, ଯୁକ୍ତରାଷ୍ଟ୍ର) ରୁ ELISA କିଟ୍ ବ୍ୟବହାର କରି ମାପ କରାଯାଇଥିଲା |

2.4.5। ପ୍ରକୃତ-ସମୟ ପରିମାଣିକ RT-PCR ବିଶ୍ଳେଷଣ |

TRI reagent® (ସିଗମା-ଆଲଡ୍ରିଚ୍, ସେଣ୍ଟ୍ ଲୁଇସ୍, MO, ଯୁକ୍ତରାଷ୍ଟ୍ର) ବ୍ୟବହାର କରି ଆଣ୍ଠୁ ଗଣ୍ଠି ଟିସୁରୁ ମୋଟ RNA ବାହାର କରାଯାଇଥିଲା, SYBR ସବୁଜ (ଆପ୍ଲାଏଡ୍ ବାୟୋ ସିଷ୍ଟମ୍) ସହିତ ଏକ ଟିଏମ୍ ୱାନ୍ ଷ୍ଟେପ୍ RT PCR କିଟ୍ ବ୍ୟବହାର କରି ସିଡିଏନ୍ଏ ଏବଂ PCR- ବର୍ଦ୍ଧିତ CDR ରେ ଓଲଟା ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ | , ଗ୍ରାଣ୍ଡ ଦ୍ୱୀପ, NY, ଆମେରିକା) | ରିଅଲ୍ ଟାଇମ୍ ପରିମାଣିକ PCR ଆପ୍ଲାଏଡ୍ ବାୟୋ ସିଷ୍ଟମ୍ 7500 ରିଅଲ୍ ଟାଇମ୍ PCR ସିଷ୍ଟମ୍ (ଆପ୍ଲାଏଡ୍ ବାୟୋ ସିଷ୍ଟମ୍, ଗ୍ରାଣ୍ଡ ଦ୍ୱୀପ, NY, ଯୁକ୍ତରାଷ୍ଟ୍ର) ବ୍ୟବହାର କରି କାର୍ଯ୍ୟ କରାଯାଇଥିଲା | ପ୍ରାଥମିକ କ୍ରମ ଏବଂ ଅନୁସନ୍ଧାନ କ୍ରମ ସାରଣୀରେ ପ୍ରଦର୍ଶିତ ହୋଇଛି |1। ନମୁନା cDNA ଗୁଡ଼ିକର ଆଲିକଟ୍ ଏବଂ ସମାନ ପରିମାଣର GAPDH cDNA TaqMan® ୟୁନିଭର୍ସାଲ୍ PCR ମାଷ୍ଟର ମିଶ୍ରଣ ସହିତ ଉତ୍ପାଦକଙ୍କ ନିର୍ଦ୍ଦେଶ ଅନୁଯାୟୀ (ପ୍ରୟୋଗ ହୋଇଥିବା ବାୟୋ ସିଷ୍ଟମ୍, ଫୋଷ୍ଟର, CA, ଯୁକ୍ତରାଷ୍ଟ୍ର) ସହିତ DNA ପଲିମେରେଜ୍ ଧାରଣ କରାଯାଇଥିଲା | PCR ଅବସ୍ଥା 50 ° C ରେ 2 ମିନିଟ୍, 94 ° C ରେ 10 ମିନିଟ୍, 95 ° C ରେ 15 ମିନିଟ୍ ଏବଂ 40 ଚକ୍ର ପାଇଁ 1 ମିନିଟ୍ 60 ° C ରେ ଥିଲା | ନିର୍ମାତାଙ୍କ ନିର୍ଦ୍ଦେଶ ଅନୁଯାୟୀ, ତୁଳନାତ୍ମକ Ct (ଏମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ ପ୍ଲଟ୍ ଏବଂ ଥ୍ରେସହୋଲ୍ଡ ମଧ୍ୟରେ କ୍ରସ୍ ପଏଣ୍ଟରେ ଥ୍ରେଶୋଲ୍ଡ ଚକ୍ର ସଂଖ୍ୟା) ବ୍ୟବହାର କରି ଟାର୍ଗେଟ୍ ଜିନ୍ ର ଏକାଗ୍ରତା ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରାଯାଇଥିଲା |

FOB ମୂଲ୍ୟ:US $ 0.5 - 9,999 / ଖଣ୍ଡ |

ମିନି ଅର୍ଡ଼ର ପରିମାଣ:100 ଖଣ୍ଡ / ଖଣ୍ଡ

ଯୋଗାଣ କ୍ଷମତା:ପ୍ରତି ମାସରେ 10000 ଖଣ୍ଡ / ଖଣ୍ଡ |